Obatoclax Mesylate;GX15-070

Obatoclax Mesylate (GX15-070)是一种Bcl-2拮抗剂，无细胞试验中Ki为0.22 μM，可以协助抑制MCL-1介导的抗细胞凋亡作用。

特性

Obatoclax是有应用前景的小分子Bcl-2拮抗剂，抑制Bcl-2蛋白家族所有相关的膜结构，包括 Mcl-1。

靶点

体外研究

5 μM Obatoclax作用于SK-Mel5细胞完全抑制Mcl-1参与的Bak修复，且阻断由Mcl-1引起的抗ABT-373诱导的KB/Bcl-2细胞凋亡。Obatoclax是拟BH3，可以与许多Bcl-2家族成员结合，包括Bcl-2, Bcl-xL,和Mcl-1。Obatoclax特异取代Mcl-1的激活BH3域，随后引起Bak低聚反应和细胞色素C释放调节的细胞凋亡。Obatoclax可有效作用于缺乏Bcl-xL或Bcl-xL低表达的细胞系，Obatoclax作用于所有强表达Mcl-1, Bcl-2,和Bcl-xL的细胞系时显示出较低的细胞毒性。Obatoclax抑制多发性骨髓瘤细胞（MM）系如KMS12PE, KMS18, MY5等等，IC50值为52到1100nM。当有浓度为150 nmol的抗细胞毒素剂IL-6 或IGF-1存在时，也可观察到抑制作用。Obatoclax增强melphalan, dexamethasone,或bortezomib的抗骨髓瘤活性。Obatoclax加强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）调节的细胞凋亡。

MB7269

ABT-199(GDC-0199)

MB4611

ABT-263 (Navitoclax)

MB3970

HA14-1

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.4184 mL

12.0922 mL

24.1844 mL

5 mM

0.4837 mL

2.4184 mL

4.8369 mL

10 mM

0.2418 mL

1.2092 mL

2.4184 mL

50 mM

0.0484 mL

0.2418 mL

0.4837 mL

Bcl-2结合实验:
使用SIE计分函数计算Obatoclaxs与BCL-2的结合力。[4]为了确定实验的准确性，计算一组12个小分子与BCL-2的结合亲和力。

细胞实验

• Cell lines:人类多发性骨髓瘤细胞（MM），外周血淋巴细胞(PBLs)，及髓基质细胞(BMSCs)
• Concentrations:10 μM 左右
• Incubation Time:48-72小时
• Method:Obatoclax溶解在DMSO中，浓度为5 mM。通过MTT实验测细胞活力。人类多发性骨髓瘤细胞（MM），外周血淋巴细胞(PBLs)，及髓基质细胞(BMSCs)按每孔2×104(HMCLs) 或5~10×103(PBLs)密度接种在96孔板上。加入不同浓度的Obatoclax，实验组加入IGF-1(50 ng/mL)或IL-6(10 ng/mL)，对照组不加。细胞温育48到72小时，测定细胞活力。

动物实验

• Animal Models:携带SW480, C33A, PC3,和4T1细胞的雌性BALB/c 或CB17 SCID/SCID鼠。
• Formulation:Obatoclax在9.6%聚乙二醇 300, 0.4% Tween-20, 及5% 葡聚糖的混合物中配制; 然而用于4T1肿瘤模型实验时，Obatoclax在浓度为0.6 mg/ml 包含9.48%聚乙二醇300, 0.38% Tween-20, 1.2 mg/ml甘露醇,及5% 葡聚糖的混合物中配制。
• Dosages:0.0313, 0.25, 0.5，和2 mg/kg
• Administration:在鼠尾部静脉注射，每天一次。