TGX221

TGX-221是特异性的p110β抑制剂，IC50为5 nM,作用于p110β比作用于p110α选择性高1000倍。

靶点

PI3K p110β

PI3K p110δ

IC50

8.5 nM

211 nM

体外研究

使用重组p85/p110，进行体外PI3K实验，测定TGX-221作用于不同亚型的活性，TGX-221有效且高度选择性作用p110β，作用于PI3K p110β和PI3K p110δ时, IC50分别为8.5和211 nM。而且,TGX-221作用于J774.2巨噬细胞，局部降低胰岛素诱导的PKB在Ser473位点磷酸化。TGX-221作用于体外循环(ECC)模型，抑制血小板-ECC相互作用,血小板凝聚，和血小板-粒细胞结合。最新研究显示,用0.2, 2,和20 μM TGX-221处理PC3细胞，抑制增殖，且明显降低p110β PI3K亚型的活性。

体内研究

作为抗血栓形成的药剂, TGX-221按1+1(49±13.9%)和3+3(88±10.6%)剂量处理小鼠模型，30分钟后，提高综合性血流量。此外, TGX-221按3+3(平均值1560)和1+1 (1305)剂量处理，提高尾出血时间(BT)和平均肾脏BT。

特征

TGX-221是有效的可渗透细胞的PI3K p110β选择性抑制剂

GSK2126458 (GSK458)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.7439 mL

13.7197 mL

27.4394 mL

5 mM

0.5488 mL

2.7439 mL

5.4879 mL

10 mM

0.2744 mL

1.3720 mL

2.7439 mL

50 mM

–

–

–

脂质激酶活性实验:
使用标准脂质激酶活性，及PI作为底物测定IC50值(i)使用100 μM 冰冻ATP代替10 μM, (ii)DMSO浓度为1%, (iii)使用[γ-33P]ATP代替[γ-32P]ATP。使用感光成像仪扫描测量TLC板。使用重组蛋白进行至少三组独立实验，通过回归曲线分析测定IC50值。

细胞实验

• Cell lines:PC3细胞
• Concentrations:0.2到20 μM
• Incubation Time:24-72小时
• Method:测定增殖,细胞接种在96孔培养板上，重复2份，温育过夜，使细胞粘附。细胞和TGX-221温育24,48,和72小时。指定的时间间隔,通过结晶紫染色比色法量化细胞。加入100 μl 2.5%戊二醛溶液和细胞混合，然后在室温下温育30分钟。板侵泡在PBS溶液中洗三次。 烘干板，然后加入100 μL 0.1%溶于去离子水的结晶紫溶液染色，然后在室温下温育20分钟，用去离子水大面积冲洗，移除过量染料，然后烘干板，然后把染料溶化在100 μL 10% 乙酸中。使用酶标仪在570 nm处直接测量染料抽提物的光密度。

动物实验

• Animal Models:患FeCl3诱导的动脉血栓鼠
• Formulation:TGX-221 溶于 10% 乙醇, 10% 樟脑, 10% N,N-二甲基乙酰胺, 70% 蒸馏水
• Dosages:0.3 + 0.3, 1 + 1, 3 + 3 mg/kg + mg/kg/hour
• Administration:静脉注射