基本信息
| 分子式 | C30H33ClN4O2 | 结构式 |  |
| 分子量 | 517.06 | ||
| CAS No. | 336113-53-2 | ||
| 储存条件 | −20℃，避光防潮密闭干燥 | ||
| 溶解性(25°C) | DMSO: 103 mg/mL;
Ethanol: 103 mg/mL; Water Insoluble |
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| 注意事项 | 溶解性是在室温下测定的，如果温度过低，可能会影响其溶解性。 | ||
| 其他说明 | 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 | ||
简介：Ispinesib是一种特异性的纺锤体驱动蛋白KSP抑制剂，Kiapp值为1.7 nM。
别名：SB-715992
物理性状及指标：
外观：……………………白色至淡黄色固体
纯度：……………………>98%
澄清度：…………………DMSO中澄清，无杂质
有机溶剂残留：…………符合ICH及中国药典规定
运输条件：湿冰运输（按季节）
产品用途：科研试剂，广泛应用于分子生物学、细胞生物学、药理学等科研方面，严禁用于人体。Ispinesib是一种特异性的KSP抑制剂。本品可用于相关领域的科研实验。
生物活性：
| 产品描述 | Ispinesib是有效的，特异性的，可逆的KSP抑制剂，Kiapp为1.7 nM，对CENP-E,RabK6,MCAK,MKLP1,KHC和Kif1A没有抑制作用。Ispinesib可诱导有丝分裂阻滞和细胞的凋亡。 |
| 靶点 | KSP(HsEg5) |
| IC50 | 1.7 nM(Kiapp) |
| 体外研究 | Ispinesib是有效可逆的特定KSP变构抑制剂，KSP与微管的结合性能，通过抑制ADP释放而不改变微管中KSP-ADP复合体的释放，而扰乱KSP的运动。Ispinesib作用于一系列肿瘤细胞系，包括Colo205,Colo201,HT-29,M5076,Madison-109，和MX-1,IC50为1.2 nM到9.5 nM，具有很强细胞毒性。15 nM和30 nM Ispinesib作用于PC-3前列腺癌细胞，通过调节控制凋亡，细胞增殖，细胞周期，和信号的基因表达水平，如EGFR,p27,p15，和IL-11，而抑制细胞增殖和诱导凋亡。7.4 nM–600 nM Ispinesib作用于一组53种乳腺癌细胞系，具有广谱抑制活性。150 nM Ispinesib作用于BT-474和MDA-MB-468细胞，诱导凋亡，提高凋亡细胞比例，降低抗凋亡的Bcl-XL水平，和提高促凋亡的Bax和Bid水平。 |
| 激酶实验 | 使用丙酮酸激酶-乳酸脱氢酶检测体系进行驱动蛋白的特异性分析，伴随着NADH氧化产生ADP。在340 nm处检测吸光度的变化。使用纳摩尔浓度KSP进行稳态研究，使用一个敏感的荧光为基础的检测系统，利用丙酮酸激酶，丙酮酸氧化酶，辣根过氧化物酶（HRP）耦合的检测体系，伴随着Amplex红色荧光试剂氧化为试卤灵而生成ADP。通过荧光检测产生的试卤灵。在含10µM紫杉醇的PEM25 buffer[25 mM Pipes-K+(pH 6.8),2 mM MgCl2,1 mM EGTA]中进行稳态生化试验。在含500µM ATP，5µM微管，和1 nM KSP的PEM25 buffer中测定抑制稳定的IC50值。通过剂量-反应曲线获得Ispinesib的Ki app(明显的抑制剂解离常数)值，通过使用Morrison方程明确纠正酶浓度。在稳态情况下测定抑制剂形态（竞争性，非竞争性，无竞争力的，或者混合生物）。 |
| 体内研究 | Ispinesib按4.5 mg/kg-15 mg/kg剂量作用于携带移植瘤的小鼠模型，有效抑制Colo205,Colo201,HT-29细胞，但是不抑制MX-1细胞。SB-715992按6 mg/kg-10 mg/kg剂量处理，也抑制小鼠实体瘤，包括Madison 109肺癌，M5076肉瘤，及L1210和P388白血病。Ispinesib按8 mg/kg-10 mg/kg剂量作用于携带乳腺癌细胞MCF-7,HCC1954,MDA-MB-468，和KPL4移植瘤的小鼠，抑制肿瘤生长。 |
溶液配制：
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.9340 mL | 9.6701 mL | 19.3401 mL |
| 5 mM | 0.3868 mL | 1.9340 mL | 3.8680 mL |
| 10 mM | 0.1934 mL | 0.9670 mL | 1.9340 mL |
使用方法：（来源文献，仅供参考）
- 激酶实验：使用丙酮酸激酶-乳酸脱氢酶检测体系进行驱动蛋白的特异性分析，伴随着NADH氧化产生ADP。在340 nm处检测吸光度的变化。使用纳摩尔浓度KSP进行稳态研究，使用一个敏感的荧光为基础的检测系统，利用丙酮酸激酶，丙酮酸氧化酶，辣根过氧化物酶（HRP）耦合的检测体系，伴随着Amplex红色荧光试剂氧化为试卤灵而生成ADP。通过荧光检测产生的试卤灵。在含10µM紫杉醇的PEM25 buffer[25 mM Pipes-K+(pH 6.8),2 mM MgCl2,1 mM EGTA]中进行稳态生化试验。在含500µM ATP，5µM微管，和1 nM KSP的PEM25 buffer中测定抑制稳定的IC50值。通过剂量-反应曲线获得Ispinesib的Ki app值，通过使用Morrison方程明确纠正酶浓度。
- 动物实验：肿瘤体积约为250 mm3的小鼠接受单剂量的Ispinesib(10 mg/kg)。切除肿瘤，10%福尔马林缓冲固定，石蜡包埋，制备5μm组织切片。在50 mM柠檬酸缓冲液(pH 5.5)中煮沸提取抗原，3%过氧化氢中孵育切片，使用PBS-0.1%Tween洗涤，并用10%山羊血清封闭。Phospho-histone H3(PH3)抗体采用Alexa Fluor 488二抗检测。使用显微镜拍摄图像，通过计算PH3阳性细胞/总细胞的面积比来量化PH3表达。
【注意】
- 我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
- 部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。
参考文献：
- Lad L,Luo L,Carson JD,Wood KW,Hartman JJ,Copeland RA,Sakowicz R.Mechanism of inhibition of human KSP by ispinesib.Biochemistry.2008 Mar 18;47(11):3576-85.
- Davis DA,Sarkar SH,Hussain M,Li Y,Sarkar FH.Increased therapeutic potential of an experimental anti-mitotic inhibitor SB715992 by genistein in PC-3 human prostate cancer cell line.BMC Cancer.2006 Jan 24;6:22.
- Purcell JW,Davis J,Reddy M,Martin S,Samayoa K,Vo H,Thomsen K,Bean P,Kuo WL,Ziyad S,Billig J,Feiler HS,Gray JW,Wood KW,Cases S.Activity of the kinesin spindle protein inhibitor ispinesib(SB-715992)in models of breast cancer.Clin Cancer Res.2010 Jan 15;16(2):566-76.