分子式:C14H7F2NO7 分子量:339.20
简介:Pacific Blue琥珀酰亚胺酯一种蓝色荧光染料,可以通过与生物分子上的氨基反应,生成稳定的共价键,从而将染料分子标记到生物分子上。具有良好的光稳定性,能够在长时间的观察和检测中保持荧光信号的稳定。最佳激发/发射波长约为 405/455 nm。
别名:Pacific Blue SucciniMidyl Ester;Pacific Blue NHS ester;Ocean Blue, SE;3-Carboxy-6,8-difluoro-7-hydroxycoumarin;3-羧基-6,8-二氟-7-羟基香豆素;太平洋蓝琥珀酰亚胺酯
物理性状及指标:
外观:……………………淡黄色固体
溶解性:…………………DMSO:15mg/mL,甲醇、乙醇、DMF中微溶,水中不溶解
纯度:……………………>99%
澄清度:…………………DMSO中澄清,无杂质
有机溶剂残留:…………符合规定
储存条件:−20℃,避光防潮密闭干燥
运输条件:湿冰运输
产品用途:科研试剂,广泛应用于分子生物学、细胞生物学、药理学等科研方面,严禁用于人体。
1.蛋白标记:可以与蛋白、多肽、抗体进行偶联,形成荧光标记的蛋白复合物,用于研究蛋白在细胞内的定位、动态变化和互作分析。另外标记抗体可用于免疫分析、细胞检测等。
2.核酸标记:通过其琥珀酰亚胺酯基团与核酸的氨基基团发生共价连接,从而实现对核酸的荧光标记。可提高核酸检测的灵敏度和特异性,有助于在分子生物学研究中追踪和检测特定的核酸序列。
3.细胞标记:用于标记细胞内的特定分子或结构,通过其强荧光性在显微镜下进行观察或通过流式细胞仪进行分选。可应用于荧光细胞条形码技术,通过为细胞赋予独特的荧光条形码,可以实现细胞的高通量筛选和分类。
4.信号增强:如在IHC、ICC和FISH等检测中,Pacific Blue琥珀酰亚胺酯可用于增强检测信号的强度和稳定性,提高实验结果的准确性和可靠性。
使用方法:(来自公开文献,仅供参考)
- 标记蛋白:
(1) 将大约100mg蛋白质溶解在1 mL的0.1 M碳酸氢钠缓冲液中。
(2) 将Pacific Blue琥珀酰亚胺酯以10 mg/mL溶解在DMF或(磺酰氯除外)DMSO中。
(3) 在搅拌或涡旋蛋白质溶液(步骤1)的同时,缓慢加入50-100μL反应性染料溶液(步骤2制备)。
(4) 在室温下连续搅拌将反应孵育1小时。
(5) 可选:加入0.1 mL新鲜制备的1.5 M羟胺(pH 8.5)停止反应,并将含羟胺的反应在室温下孵育1小时。
(6) 使用PBS或其他合适的缓冲液,于10*300mm色谱柱进行纯化。
(7) 标记后的蛋白储存条件:将偶联物储存在与母体蛋白相同的条件下即可。
- 标记细胞:
(1) 使用甲醇对细胞进行常温固定。
(2) 加入合适浓度的Pacific Blue琥珀酰亚胺酯染料工作液,确保染料均匀覆盖细胞表面。
(3) 在适当的温度和时间条件下进行孵育,使染料充分进入细胞并与目标分子结合。
(4) 使用适当的缓冲液(如PBS)对染色后的细胞进行洗涤,以去除未结合的染料和杂质。
(5) 使用荧光显微镜、共聚焦显微镜进行观察分析,激发/发射波长约为 405/455 nm。
【注意】
- 我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
- 部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
参考文献:
[1] Krutzik PO, Nolan GP. Fluorescent cell barcoding in flow cytometry allows high-throughput drug screening and signaling profiling. Nat Methods. 2006 May;3(5):361-8.
[2] Krutzik PO, Crane JM, Clutter MR, Nolan GP. High-content single-cell drug screening with phosphospecific flow cytometry. Nat Chem Biol. 2008 Feb;4(2):132-42.