产品简介：
SYTO 9是一种可以与核酸结合并发出明亮绿色荧光的细胞渗透性荧光染料。SYTO 9应用广泛，可以用来染色活细胞、死细胞及细菌中的RNA和DNA。另外也可以用于RT-PCR、DNA溶解曲线分析及环介导等温扩增（LAMP）实验，其PCR抑制率低、信噪比高、灵敏度高，是SYBR Green I的理想替代染料。本产品以高纯度粉末形式提供，可以根据实验需求自行配制不同浓度的溶液使用，操作灵活，用途广泛。
分子量：305.42
物理性状及指标：
外观：……………………橙色固体
纯度：……………………>98%
溶解性：…………………DMSO：＞1.527mg/ml（5mM）
澄清度：…………………DMSO中澄清，无杂质
激发/发射波长：…………485/498nm（与DNA结合）；486/501nm（与RNA结合）
用途及描述：
科研试剂，广泛应用于分子生物学、细胞生物学、药理学、微生物学等科研方面，严禁用于人体。
1．细胞染色：SYTO 9具有细胞膜渗透性，能够很好地渗透进入原核和真核细胞膜，广泛与细胞核、细胞质及线粒体内的DNA和RNA结合发出明亮的绿色荧光。
2．细菌活死染色：SYTO 9常与碘化丙啶（PI）联合使用，用于区分活细菌和死细菌，评估细菌的存活率或药物对细菌的影响。
3．RT-PCR、DNA熔解曲线分析及环介导恒温扩增技术（LAMP）：SYTO9作为一款灵敏的DNA结合染料，可以替代SYBR Green I用于核酸扩增实验中。
使用方法推荐：（来自公开文献，仅供参考）
- 细胞染色：
(1) SYTO 9储存液配制：以1mg产品为例，加入654.8μL DMSO，充分溶解，制备成5mM母液。溶解后的母液建议分装，避光储存于-20℃，可稳定保存1年。
(2) 根据实验样本类型，参考表1内建议的工作液浓度稀释染料。注意：初次实验，请在建议浓度范围内多设置不同的梯度浓度，以确定能得到最佳染色效果的工作液浓度。悬浮细胞：离心收集细胞，用生理盐溶液重悬细胞。贴壁细胞（比如：哺乳动物细胞）：可以在盖玻片或细胞培养板上原位染色。
(3) 根据表1提供的孵育条件进行孵育染色。注意：生长培养基、细胞密度、是否存在其它细胞和其它因素都可能影响染色。染色条件需要根据不同细胞类型和实验进行调整。
(4) 使用荧光显微镜观察染色结果。染色的真核细胞通常显示出弥散的细胞浆染色、细胞核染色及明亮的核内小体染色，呈现绿色荧光。由于此染料具细胞膜渗透性，且中性pH下带净正电荷，也有可能染线粒体。活酵母菌内主要为线粒体染色。
| 表1. SYTO 9染色不同细胞的建议工作浓度和孵育条件 | ||
| 细胞类型 | SYTO 9浓度 | 孵育条件 |
| 细菌 | 50nM-20µM | 涡旋混匀，孵育1-30 min |
| 真核细胞 | 10nM-5µM | 孵育10-120 min |
| 微阵列 | 50nM in TE buffer | 孵育5 min，清洗之后晾干 |
- 活死细菌染色：
(1) SYTO 9储存液配制：以1mg产品为例，加入654.8μL DMSO，充分溶解，制备成5mM母液。
(2) 用棕色离心管稀释SYTO 9和PI（美仑货号：MA0137/MB2920），使其浓度分别为33.4µM和400µM。
(3) 向0.9mL收集的细菌培养物中加入SYTO 9和PI工作液各50μL，使其最终浓度分别为1.67µM和20µM。
(4) 避光孵育15分钟。
(5) 使用荧光显微镜观察或者流式细胞仪进行检测。
- RT-PCR和DNA熔解曲线分析
以1mg产品为例，加入1.6371mL DMSO，完全溶解，即为配制1000x SYTO 9染料溶液（2mM）。在扩增体系中加入终浓度2µM的SYTO 9，与体系混合均匀后，进行RT-PCR程序，使用FAM通道进行结果分析。
- 环介导恒温扩增技术（LAMP）
在扩增体系中加入终浓度为0.4mM的SYTO 9，与体系混合均匀后，扩增条件设置为63℃ 50min进行扩增。
储存条件：
-20℃，避光防潮密闭干燥。
运输条件：
湿冰运输（按季节）
【注意】
- 建议使用塑料管稀释SYTO9染色剂，稀释后的染色剂会粘附在玻璃上，因此建议避免使用玻璃器皿。
- 建议使用不含磷酸盐的缓冲液，可以得到更好的染色效果。
- 塑料或玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响染色效果，导致在含或者不含细胞的溶液中都能看到明亮荧光的材料。建议用温和的清洁剂清洗所有实验室器皿，用热自来水完全冲洗干净，最后用去离子水冲洗数次。
- 荧光探针均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
- 我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
- 部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。