产品描述:
昆虫细胞-杆状病毒表达系统(baculovirus expression vector system, BEVS)是基于昆虫杆状病毒及其宿主细胞建立的表达体系,与大肠杆菌、酵母和哺乳动物细胞表达系统并称基因工程的四大表达系统。昆虫细胞无血清培养基(Sf-900)是专门针对Sf9等昆虫细胞设计开发的无血清、无蛋白培养基,适用于昆虫细胞高密度悬浮培养以及BEVS高效蛋白表达。昆虫细胞无血清培养基(Sf-900)可应用于药品研发、重组蛋白生产、人用/兽用疫苗生产和基因治疗等多个方面。昆虫细胞无血清培养基(Sf-900)需要环境CO2以维持生理pH值。
This Insect Cell Culture Medium is modified as follows:
With含有 | Without不含 |
• Sodium bicarbonate 碳酸氢钠 | • Phenol Red 酚红 |
• L-Glutamine L-谷氨酰胺 | |
• D-Glucose D-葡萄糖 |
产品优势:
√ 成分安全有效:无动物来源成分,无血清,不含蛋白质或多肽成分,包含源自非动物来源的游离氨基酸、二肽或三肽,还包含植物、酵母或细菌的水解产物。组分相对稳定,添加了类固醇激素和脂类前体,针对昆虫细胞的生理特征而设计。
√ 支持高密度Sf9细胞的悬浮生长:生长密度可以达到1.3E+05个细胞/ml以上,细胞生长速度快。
√ 支持Sf9的静置培养:与进口同类对照相比,细胞增殖更多,细胞状态更好。
√ 高效转染杆状病毒质粒:重组病毒中目的蛋白表达量媲美进口同类对照。
√ 蛋白表达量高:支持侵染表达目的蛋白的重组杆状病毒液,目的蛋白表达量高。
√ 注射用水配制,参考GMP管理体系生产,工艺稳定,批间差异小。
√ 原料均选用自产或者经过严格检测和纯化的低内毒素高纯药用级别原料。
√ 严格的质量检测程序,远高于同行业要求指标,产品性能突出,指标媲美进口。
√ 热原(内毒素)水平低,减少外源内毒素干扰。
生产工艺:本产品使用注射用水(Water-For-Injection)配制,生产程序参考GMP管理规定,并在体外诊断试剂备案净化车间中完成。公司已取得ISO9001质量体系认证。
保存条件:2-8℃避光保存,自生产之日起12个月有效。
运输条件:常温或湿冰运输(按季节)。
操作方法:详见说明书
注意事项:
1.为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行冻融处理。
2.本产品为无菌包装,请注意无菌取用。
3.本培养基中碳酸氢钠含量为350mg/L,为了能与空气中的二氧化碳达到平衡从而起到缓冲作用,可以直接于无二氧化碳培养箱中培养昆虫细胞,而不能放于5%二氧化碳环境中。
4.为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
产品数据展示:
一:Sf9细胞悬浮(摇瓶震荡)培养
以1E+06 cells/ml将Sf9细胞接种到摇瓶中,分别使用美仑、进口G品牌、国产A品牌、国产Y品牌的昆虫细胞无血清培养基震荡培养7天,每天进行取样,检测细胞数和存活率。
如图1所示,美仑昆虫细胞无血清培养基培养的悬浮Sf9,细胞密度曲线与进口G品牌相近,最大密度≈进口G品牌>1.2E+07cells/ml;与国产对照相比,细胞生长速率更快,密度更高,维持时间更长。
图1. 四种培养基悬浮培养Sf9细胞生长曲线的比较
二:Sf9细胞贴壁(静置)培养
以1E+05 cells/孔将Sf9细胞接种到12孔培养板中,分别使用美仑和进口G品牌昆虫细胞无血清培养基静置培养,于培养的第4天检测细胞数和存活率。
如图2和图3所示,美仑昆虫细胞无血清培养基培养的贴壁Sf9,4天细胞增殖数和存活率>进口G品牌,细胞形态良好。
图2. 两种培养基静置培养Sf9四天后显微镜下(40×)细胞形态的比较
图3. 两种培养基静置培养Sf9四天后细胞增殖情况的比较
三:转染杆状病毒质粒
以2E+05 cells/孔将Sf9接种到12孔板中,在相同条件下转染Bacmid-EGFP杆状病毒质粒,6h后分别换液为美仑、进口G品牌、国产A品牌、国产Y品牌的昆虫细胞无血清培养基,于转染后的144h在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况。
如图4所示,美仑昆虫细胞无血清培养基用于转染后绿色荧光强度和数量与进口G品牌相近,优于国产对照,说明重组病毒中绿色荧光蛋白表达情况较好。
图4. 转染Bacmid-EGFP的Sf9用四种培养基培养后P1病毒绿色荧光蛋白表达情况的比较
四:重组杆状病毒感染Sf9效果
以1E+06 cells/孔将Sf9接种到12孔板中,在相同条件下用P1-baculovirus-EGFP杆状病毒感染细胞,培养基分别使用美仑、进口G品牌、国产A品牌、国产Y品牌的昆虫细胞无血清培养基,于侵染后的72h在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况。
如图5所示,美仑昆虫细胞无血清培养基用于侵染后绿色荧光强度和数量稍高于进口G品牌,优于国产对照,说明重组病毒扩增和绿色荧光蛋白表达情况较好。
图5. 侵染P1-baculovirus-EGFP的Sf9用四种培养基培养后P2病毒绿色荧光蛋白表达情况的比较
声明:本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。