高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒(闪光型)

¥560.00¥2,800.00

英文名字:Gaussia Luciferase Flash Assay Kit
质量标准:Meiluncell
货号: PWL212

产品简介

高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒(闪光型)提供一种高灵敏度的检测系统。高斯荧光素酶(Gaussia Luciferase,185 AA,19.9 kDa)是一种分泌型萤光素酶,Gaussia Luciferase 质粒转染细胞后,大部分 Gaussia Luciferase 可以分泌到细胞外,所以本试剂盒既可以用于细胞培养上清样品的检测,也可以用于细胞裂解样品或纯化的酶的检测,特别适用于酶活性的实时研究。

Gaussia Luciferase 产生的生物发光信号原理是腔肠素(Coelenterazine)的氧化反应,该反应不需要ATP或其他辅助因子。

反应原理如下:

注意事项:

1.检测仪器选择:能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测,但是针对相同的样品,不同检测器本底信号值和测量值均可能不同;且对于同一样本检测,不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰,推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。

2.由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响,所以应确保同组内不同样本检测条件一致。

3.酶促反应对温度较为敏感,加样检测前务必将检测工作液以及细胞培养板平衡至室温。

4.高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒(闪光型)具有高发光信号特点,发光强度最大可达100万以上。但当酶表达量过低时,发光信号会降低。建议根据实际情况优化实验设计方案(如增加质粒转染量),避免萤光素酶表达量过低。

5.Gaussia Flash Assay Substrate (100×) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发,有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况,此时用无水乙醇把体积补足至包装规格,并混匀后即可使用。

保存条件

-20℃避光保存,自生产之日起12个月有效。

运输条件

干冰运输。

产品数据展示

  1. GaussiaFlash Assay 发光强度及线性检测

方法:将Gaussia萤光素酶载体瞬时转入HEK293T细胞,24小时后收集培养上清,分别使用PWL212及G品牌同类产品,正常使用量(样品20μL+工作液50μL)及减半使用量(样品20μL+工作液25μL)检测发光情况。

结果:PWL212的发光亮度高于G进口品牌,PWL212减半使用发光亮度无明显变化。PWL212线性关系良好。

图1.  Gaussia萤光素酶发光强度及线性检测

  1. 多种细胞中Gaussia萤光素酶的检测情况

方法:将Gaussia萤光素酶载体分别瞬时转入HEK293T、Vero、HCT116、CHO-K1细胞中,24小时后收集培养上清,分别使用PWL212及G品牌同类产品检测发光情况。

结果:同一种细胞内Gaussia萤光素酶检测,PWL212的发光亮度高于G进口品牌。Gaussia萤光素酶在HEK293T细胞中表达量最高。

图2.  多种细胞中Gaussia萤光素酶的检测情况对比图

左图:PWL212;右图:G品牌

规格

100T, 1000T

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