棕榈酸钠BSA高脂细胞添加剂

产品简介：

1.本产品的有效成分是棕榈酸钠(Sodium palmitate)，浓度是6mM。

2.本产品为无菌（0.22μm 过滤）溶液，可与完全培养基直接互溶用于实验。

3.本产品中高脂细胞添加剂及溶剂对照均为淡黄色清亮液体。

4.本产品可与油酸钠(Sodium oleate)共同模拟高自由脂肪酸环境，也可用于诱发细胞脂毒性、诱导内质网应激、氧化应激、线粒体损伤、细胞凋亡等

产品优势：

1. 即用型溶液：无需准备、减少操作步骤和外源污染。
2. 进口原料：能够提供更稳定的质量和性能。
3. 浓度准确：保证不同批次的一致性，提高实验的可重复性和可靠性。
4. 稳定性好：配制工艺先进，无析出，具有更好的化学稳定性，便于长时间储存。
5. 安全性：溶剂不含 NaOH 或有机溶剂无毒性，对细胞无毒性。

注意事项：

1. 收到产品后可分装后于-20℃长期保存；可在2~8℃短期保存3个月。
2. 由于溶剂 BSA 影响吸光度，在使用CCK-8（美仑货号：MA0225/ MA0218）检测细胞毒性时，在弃掉高脂细胞添加剂与培养基混液后，需要用PBS清洗细胞2~3次，再加入CCK-8工作液。

保存条件：

-20℃保存，自生产之日起12个月有效。

运输条件：

湿冰运输。

产品数据展示：

1、细胞毒性试验

方法：（1）H9C2(2-1)按照1*10^5/mL细胞数铺板48孔板；

（2）给药：24小时后吸去旧的培养基，补加新的完全培养基，添加PWL222（1:20、1:30、1:60、1:120）、PPWL222-溶剂对照、K品牌棕榈酸钠、K品牌-溶剂对照；

（3）24小时后吸去旧的培养基，用PBS清洗3遍，加入含10% CCK-8试剂的完全培养基300μL/孔，孵育50 min，在450nm处测定各孔的吸光度，观察药物对细胞生存的影响。

结果：如图所示，PWL222诱导 H9C2(2-1)细胞损伤毒性试验结果与K品牌相近；PWL222-溶剂对照基本无细胞毒性，优于K品牌。

 

图1  棕榈酸钠诱导H9C2(2-1)细胞毒性

图2  CCK-8检测棕榈酸钠诱导H9C2(2-1)细胞毒性

2、细胞凋亡试验

方法：（1）H9C2(2-1)按照1*10^5/mL细胞数铺板12孔板；

（2）给药：24小时后吸去培养基，补加新的完全培养基，按照1：20（300μM）添加PWL222、PWL222-溶剂对照、K品牌棕榈酸钠、K品牌-溶剂对照；

（3）收集细胞：收集上清并用上清终止消化，使用AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒（美仑货号MA0220）处理细胞，流式检测细胞凋亡情况。

结果：如图3所示，1:20（300μM）添加PWL222诱导 H9C2(2-1)细胞凋亡显微镜下观察与K品牌基本一致，流式检测优于K品牌，PWL222-溶剂对照组未诱导细胞凋亡。

图3  棕榈酸钠诱导 H9C2(2-1)细胞凋亡流式检测

表1  棕榈酸钠诱导H9C2(2-1)细胞凋亡检测

组别	PWL222		K品牌
	溶剂对照	棕榈酸钠	溶剂对照	棕榈酸钠
细胞凋亡率（%）	0.79	37.41	2.5	26.54

3、油酸钠联合棕榈酸钠共同诱导脂肪肝细胞模型

方法：（1）Hep G2按照2.5*10^5/mL细胞数铺板6孔板；

• 给药：72小时后吸去培养基，补加新的完全培养基，按照下表给药；

组别	第一组		第二组		第三组		第四组
	油酸钠	棕榈酸钠	油酸钠	棕榈酸钠	油酸钠	棕榈酸钠	油酸钠	棕榈酸钠
美仑				250μM	500μM		500μM	250μM
K品牌	500μM	250μM	500μM			250μM

（3）48小时后吸去旧的培养基，多聚甲醛（美仑货号MA0192）固定30min，PBS清洗3遍，油红O（美仑货号MA0120）染色。

结果：如图4所示，PWL220联合PWL222共同诱导 Hep G2细胞形成脂滴效果与对照一致，均能形成又大又圆脂滴（蓝色标记）。

图4油酸钠联合棕榈酸钠依赖性诱导HepG2人肝癌细胞脂滴形成

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